วิธีละลาย Lyophilized Peptides อย่างถูกต้อง: โปรโตคอลห้องปฏิบัติการฉบับสมบูรณ์

Lyophilized peptides — ผงแห้งแช่เยือกแข็งที่จัดส่งในขวดแก้วปิดผนึก — เป็นรูปแบบมาตรฐานสำหรับสารเปปไทด์ระดับวิจัย การละลายอย่างถูกต้องเป็นสิ่งสำคัญในการรักษาความสมบูรณ์ของเปปไทด์และรับประกันผลการทดลองที่ทำซ้ำได้

คู่มือนี้ครอบคลุมโปรโตคอลการละลายที่สมบูรณ์ที่ใช้ในห้องปฏิบัติการวิจัยระดับมืออาชีพทั่วโลก

สิ่งที่คุณต้องเตรียม

ก่อนเริ่มการละลาย เตรียมวัสดุต่อไปนี้:

• ขวด lyophilized peptide — ปิดผนึก เก็บที่ -20°C หรือ 2-8°C ตามคำแนะนำบนฉลาก
• Bacteriostatic water (bacteriostatic water) — น้ำปลอดเชื้อที่มี 0.9% benzyl alcohol เป็นสารกันเสีย
• Insulin syringes — เข็มฉีดยา 1ml พร้อมเข็มขนาด 29-31 gauge สำหรับการวัดที่แม่นยำ
• Alcohol swabs — สำหรับฆ่าเชื้อจุกขวดก่อนแทงเข็ม
• เครื่องคิดเลข — สำหรับคำนวณความเข้มข้นและขนาดยา

อีกทางเลือกหนึ่ง สามารถใช้น้ำปลอดเชื้อได้หากจะใช้สารละลายภายใน 24-48 ชั่วโมง สำหรับการจัดเก็บระยะยาว แนะนำ bacteriostatic water อย่างยิ่ง

โปรโตคอลการละลายทีละขั้นตอน

ขั้นตอนที่ 1: การเตรียม

ปล่อยให้ทั้งขวดเปปไทด์และ bacteriostatic water ถึงอุณหภูมิห้อง (ประมาณ 15-20 นาที) อย่าพยายามละลายเปปไทด์เย็น — thermal shock สามารถทำให้สารเสื่อมสภาพได้

ทำความสะอาดพื้นที่ทำงานอย่างทั่วถึง เช็ดพื้นผิวทั้งหมดด้วย 70% isopropyl alcohol นี่เป็นกระบวนการปลอดเชื้อ

ขั้นตอนที่ 2: คำนวณความเข้มข้น

ก่อนเติมน้ำ กำหนดความเข้มข้นที่ต้องการ มาตรฐานวิจัยทั่วไป:

*5mg peptide + 2.5ml bacteriostatic water = 2mg/ml (2000mcg/ml)*

ซึ่งหมายความว่าทุก 0.1ml (10 หน่วยบน insulin syringe) มีเปปไทด์ 200mcg

สำหรับสารละลายที่เจือจางกว่า: 5mg + 5ml = 1mg/ml โดยที่ 0.1ml = 100mcg

ขั้นตอนที่ 3: เติม Bacteriostatic Water

1. 1เช็ดด้านบนของทั้งขวดเปปไทด์และขวด bacteriostatic water ด้วยแอลกอฮอล์
2. 2ดูดปริมาตร bacteriostatic water ที่คำนวณไว้เข้าเข็มฉีดยา
3. 3แทงเข็มผ่านจุกยางของขวดเปปไทด์ในมุมเฉียงเล็กน้อย
4. 4ค่อยๆ ปล่อยน้ำตามผนังด้านในของขวด — อย่าฉีดตรงไปที่ผง
5. 5ปล่อยให้น้ำไหลลงตามแก้วเบาๆ และรวมตัวที่ก้นขวด

ขั้นตอนที่ 4: ละลาย

อย่าเขย่าขวดเด็ดขาด การเขย่าอย่างรุนแรงสามารถทำลายพันธะเปปไทด์และทำให้สารเสื่อมสภาพ

แทนที่จะเขย่า ให้หมุนขวดเบาๆ เป็นวงกลม เปปไทด์แบบ lyophilized ส่วนใหญ่จะละลายภายใน 1-3 นาที หากผงยังคงอยู่ ให้วางขวดในตู้เย็น 15-30 นาที — ความเย็นช่วยการละลาย

สารละลายที่ได้ควรใส ไม่มีสี ความขุ่น อนุภาค หรือการเปลี่ยนสีบ่งชี้ถึงการปนเปื้อนหรือการเสื่อมสภาพ

ขั้นตอนที่ 5: การจัดเก็บ

• เก็บเปปไทด์ที่ละลายแล้วที่ 2-8°C (อุณหภูมิตู้เย็นมาตรฐาน)
• ใช้ภายใน 30 วัน หลังละลายเมื่อเก็บด้วย bacteriostatic water
• ใช้ภายใน 48 ชั่วโมง หากละลายด้วยน้ำปลอดเชื้อเท่านั้น
• ห้ามแช่แข็ง เปปไทด์ที่ละลายแล้ว — การสร้างผลึกน้ำแข็งจะทำลายโครงสร้างโมเลกุล

ข้อผิดพลาดที่ควรหลีกเลี่ยง

1. 1ฉีดน้ำตรงไปที่ผง — สร้างโฟมและทำให้เปปไทด์ผิวหน้าเสื่อมสภาพ
2. 2เขย่าขวด — การเขย่าทางกลทำลายพันธะเปปไทด์
3. 3ใช้น้ำประปาหรือน้ำที่ไม่ปลอดเชื้อ — นำสิ่งปนเปื้อนเข้ามา
4. 4เก็บที่อุณหภูมิห้อง — เปปไทด์ในสารละลายมีเสถียรภาพน้อยกว่าผงแห้ง
5. 5วงจร freeze-thaw ซ้ำ — แบ่งสารละลายทันทีหลังละลาย

ตารางอ้างอิงการคำนวณขนาดยา

ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดเป็นสารเคมีสำหรับการวิจัยในห้องปฏิบัติการเท่านั้น ไม่ใช่สำหรับการบริโภค